果聚糖是由果糖聚合而成的線型或分支型的多糖總稱。果聚糖是一類有利于人體健康的碳水化合物，進(jìn)入結(jié)腸后可以成為腸胃菌的營養(yǎng)物質(zhì)。GB5009.255—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中果聚糖的測(cè)定》規(guī)定了食品中果聚糖含量的離子色譜法測(cè)定方法，適用于乳及乳制品、嬰幼兒配方食品、嬰幼兒谷類輔助食品、固體飲料、配制酒中單獨(dú)添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的測(cè)定。

果聚糖的測(cè)定過程中您是否遇到過困難？

蔗糖酶，果聚糖酶的選擇和使用您是否有過疑問?

參照方法，聚焦產(chǎn)品，

安譜實(shí)驗(yàn)帶您一起解讀

果聚糖測(cè)定過程中的那些事兒！

實(shí)驗(yàn)原理

試樣經(jīng)熱水浸提,樣液中的蔗糖經(jīng)蔗糖酶水解成葡萄糖和果糖,葡萄糖和果糖經(jīng)硼氫hua鈉還原成相應(yīng)的糖醇,多余的硼氫hua鈉用乙酸中和。樣液中的果聚糖經(jīng)過果聚糖酶水解成果糖和葡萄糖,經(jīng)離子色譜-脈沖安培檢測(cè)器測(cè)定果糖含量,通過換算系數(shù),折算得到果聚糖的含量。

實(shí)驗(yàn)過程

檢測(cè)條件（參考GB5009.255—2016中儀器參考條件2）

實(shí)驗(yàn)譜圖

▲圖一：果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（16mg/L）

▲圖二：果糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

▲圖三：彩面樣品色譜圖

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.彩面中的果聚糖含量

2.質(zhì)控樣及標(biāo)準(zhǔn)品回測(cè)結(jié)果

產(chǎn)品信息

小貼士

如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法選擇適用的酶并進(jìn)行配置？（GB5009.255-2016方法中用到兩種酶，蔗糖酶和果聚糖酶）

一、若所選酶和方法一致，則可直接按照方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如GB5009.255-2016中蔗糖酶，方法中具體要求如下：

3.1.3 蔗糖酶:來源于酵母,酶活力≥300U。

3.2.3 蔗糖酶溶液(4.5U/mL):將蔗糖酶(活力為300U)溶解于66mL馬來酸鈉緩沖溶液,分裝到2mL的離心管中,-20℃保存,可放置6個(gè)月。使用前需測(cè)定酶活力。

安譜實(shí)驗(yàn)提供的蔗糖酶：CFHN-E-SUCR，蔗糖酶 300 Units，和方法要求的酶活一致，可按照方法3.2.3直接進(jìn)行稀釋實(shí)驗(yàn)。

二、若所選酶和方法不一致，則需要根據(jù)方法中所用酶活進(jìn)行換算后實(shí)驗(yàn)。如GB5009.255-2016中果聚糖酶，方法中具體要求如下：

3.1.7 果聚糖酶:來源于黑曲霉,酶活力≥10000U。

3.2.9 果聚糖酶溶液(455U/mL):將果聚糖酶(活力為10000U)溶解于22mL乙酸鈉緩沖溶液,分裝到2mL的離心管中,-20℃保存,可放置6個(gè)月。使用前需測(cè)定酶活力。

安譜實(shí)驗(yàn)可提供兩種果聚糖酶：

a：一種溶液型：CFHN-E-FRMXLQ-10mL，果聚糖酶混合物，2,000 U/mL

這里的果聚糖酶的濃度是2,000 U/mL，10ml的總酶活是20000U,是方法中總酶活力的2倍?？蛻粼谑褂眠^程中，只要保證果聚糖酶溶液的濃度為455U/mL，根據(jù)3.2.9方法，可以有兩種配置方法。

①可以量取5mL的E-FRMXLQ溶解于22mL乙酸鈉緩沖溶液進(jìn)行分裝；

②也可以將全部10mL的E-FRMXLQ溶解于44mL乙酸鈉緩沖溶液中進(jìn)行分裝；

b：一種固體型：CFHN-E-FRMXPD，果聚糖酶混合物，20,000 Units

這里的固體型產(chǎn)品以總酶活計(jì)，配置過程需保證果聚糖酶溶液的濃度為455U/mL，即將總酶活為20,000 Units的固體果聚糖酶混合物溶解在44mL乙酸鈉緩沖溶液中進(jìn)行分裝，注意，這個(gè)固體型酶的溶解過程，根據(jù)酶的使用說明書，先將該固體果聚糖酶全部溶解在去離子水中，再用相應(yīng)的緩沖溶液進(jìn)行稀釋。

酶的使用過程中，客戶也可以根據(jù)需要測(cè)試的樣品數(shù)量，依照所選酶的具體酶活，換算成需要的量。